色譜級甲醇彪仕奇:有時單用ACN或MEOH可能會達不到理想的分離效果,在流動相同時使用ACN和MEOH可改變選擇性以獲得較好的分離效果。
簡言之,在改變分離選擇性的時候,甲醇細調(diào),乙腈粗調(diào)。主要是為了調(diào)整流動相的粘度和強度,使得分離效果和選擇性有所改善。
基于溶劑不同的選擇性,甲醇為類質(zhì)子溶劑,可形成氫鍵,對于分離酸堿或電負性強的化合物有提高選擇性,乙腈為極性分子,其碳氮三鍵含有未成鍵電子,能與含有空軌道的化合物結(jié)合,則與甲醇有著不同的化合物選擇性。
在反相色譜中,可以把色譜過程想像為流動相中的有機溶劑是從固定相層上把溶質(zhì)給“萃取”下來的,再聯(lián)想“相似相溶原理”,就能夠理解分離化合物中流動相的種類對分離結(jié)果的改變情況了。
乙腈和甲醇分別用同樣的比率與水混合時,乙腈的洗脫能力強。特別是混合比率低時,從咖啡因和苯酚的洗脫來看,獲得同樣的保留時間,乙腈的比率,只需甲醇的比率的一半以下即可。
首先,乙腈價格高,特別是HPLC級的價格很高,但為啥文獻中的條件,多用乙腈呢?
1、吸光度。
乙腈HPLC級吸光度值低。乙腈和甲醇的市銷HPLC級和優(yōu)級的吸收光譜中,乙腈HPLC吸收最?。ㄌ貏e是在短波長上?。?。所謂HPLC級是除去具有吸收UV的雜質(zhì),在規(guī)定的波長上吸光度限制在規(guī)格值以內(nèi)。在UV檢測時,產(chǎn)生的噪聲小,因此在進行UV短波長上的高靈敏度分析時乙腈HPLC級最適宜。
另外,在UV檢測中的梯度基線上也是乙腈HPLC級產(chǎn)生鬼峰少,雖然,其他與水相溶性高的有機溶劑有各種各樣,但很難能找到比乙腈HPLC級吸收更小的。另外,甲醇的HPLC級和優(yōu)級,雖然所得的光譜相差不大,但是優(yōu)級不能保證吸光度,有可能產(chǎn)生偏差,價格也相差不大,所以盡量使用HPLC級。
2、壓力。
根據(jù)有機溶劑的種類或混合比率的不同而異,水/乙腈,水/甲醇混合液的比率與輸液壓力的關系中,甲醇與水混合,壓力增高,而乙腈同樣與水混合壓力較低。所以,乙腈在同樣的流速下不在柱內(nèi)增加多余的壓力。
3、流動相的脫氣。
乙腈類要注意混合溶劑的制備,在流動相瓶內(nèi)進行時(等濃度系統(tǒng)),甲醇與水混合時發(fā)熱,多余的溶解空氣較易變?yōu)槊摮鰵馀?脫氣容易);而乙腈由于吸熱冷卻,隨著慢慢回到室溫,產(chǎn)生氣泡,所以要考慮脫氣(加溫攪拌,過濾膜,He脫氣等。
4、分離(洗脫)的選擇性。
乙腈和甲醇在分離的選擇性上不同。由于有機溶劑分子的化學性質(zhì)(甲醇和乙醇是質(zhì)子性,乙腈和四氫呋喃是非質(zhì)子性)不同所致。因此,在用乙腈類不能獲得分離的選擇性,就試用甲醇類看看。
5、峰形。
像水楊酸化合物(在鄰位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等,用乙腈類時拖尾嚴重,用甲醇類可抑制??墒?,一般情況下,聚合物類反相柱,與硅膠柱相比,更具有峰形寬的傾向,特別是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物時常見。這在流動相使用甲醇時非常明顯,而用乙腈時不明顯。為此,用聚合物類反相用柱時建議采用后者(乙腈類),這是因為乙腈使凝膠膨潤。
6、洗脫能力。
乙腈和甲醇分別用同樣的比率與水混合時,一般情況下,乙腈的洗脫能力強。特別是混合比率低時,從咖啡因和苯酚的洗脫來看,獲得同樣的保留時間,乙腈的比率,只需甲醇的比率的一半以下即可。
另一方面,有機溶劑100%或與此極接近時,從胡蘿卜素和膽甾醇來看,常常都是甲醇的洗脫能力強?;旌媳仍?0比1等較為特殊時,調(diào)制的誤差大,影響保留時間,或平衡化的時間長,乙腈遇到這種情況時,用甲醇的10比1混合代替乙腈,操作方便些。溶劑受溫度影響時,不采用容器定量,而采用重量的方法(考慮比重),可使混合比的誤差減小。
色譜級甲醇彪仕奇致力于為客戶提供一流的產(chǎn)品和技術(shù)服務,推進企業(yè)的循環(huán)發(fā)展。