色譜級(jí)環(huán)己烷彪仕奇收集了方法概要：在嬰幼兒配方食品和乳粉中加入適量的脂酶，酶解后用NaOH 皂化，用正己烷萃取，蒸干后用正己烷溶解，用高效液相色譜柱后衍生法（HPLC-鋅粉還原柱）用熒光檢測(cè)器定量測(cè)定維生素K1。
關(guān)鍵詞：嬰幼兒配方食品，乳粉，HPLC，鋅粉還原柱
方法步驟：
1、試劑和耗材
HPLC級(jí)正己烷；無水硫酸鈉；
HPLC級(jí)甲醇；HPLC 級(jí)冰醋酸（乙酸）；HPLC級(jí)二氯甲烷；維生素K1 標(biāo)準(zhǔn)品。
2、提取
稱取約2.5 g（精確到0.1mg）混合均勻的試樣于三角瓶中（含淀粉的試樣加入0.5g 淀粉酶），用30ml 溫水溶解，加入1g 酯酶，于37℃恒溫空氣震蕩器中震蕩過夜，使其充分酶解。然后加入2ml 10mol/L氫氧化鈉溶液，轉(zhuǎn)移至500ml 的分液漏斗中，加入50ml 乙醇，充分混勻。再加入50ml 正己烷，加塞振搖2min，靜置分層。放出下層于另一個(gè)500ml 分液漏斗中再次加入50ml 正己烷萃取，靜置分層，棄去水相，合并正己烷。加入適量蒸餾水洗有機(jī)相兩次，棄取水相，將正己烷通過無水硫酸鈉過濾到500ml 的平底燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上40℃下蒸發(fā)至近干，用正己烷轉(zhuǎn)移殘留物到10ml 指形瓶中，用氮?dú)獯蹈?，?zhǔn)確加入1ml 正己烷，充分振蕩溶解殘留物，得到待測(cè)液，在冰箱中冷凍一小時(shí)后備用。
3、 HPLC 測(cè)定方法：
色譜柱、衍生柱：鋅粉還原柱，35×4.6mm（LAAA-0001）
流動(dòng)相：甲醇900ml，二氯甲烷100ml，冰醋酸0.3 ml，氯化鋅1.5g，無水乙酸鈉0.5g，溶解過0.45濾膜。
進(jìn)樣量：10 μL
流 速：1.0 mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng)：熒光檢測(cè)器：波長(zhǎng)EX=243nm EM=430nm
4、結(jié)果分析：
分析圖譜
VK1 標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（熒光檢測(cè)器）0.4ug/ml VK1 標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（熒光檢測(cè)器）0.04ug/ml
嬰幼兒配方色譜圖（熒光檢測(cè)器）
5、結(jié)果分析
兒配方食品中的維生素K1，分離效果良好，峰形對(duì)稱，重復(fù)性好。
色譜級(jí)環(huán)己烷彪仕奇致力于為客戶提供一流的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，推進(jìn)企業(yè)的循環(huán)發(fā)展！
